1.避免污染是PCR实验室设计和建造的关键考虑因素
由于PCR技术的高灵敏度,PCR技术的高要求以及许多影响因素,从样品制备到结果生成,任何细微的误差都会导致结果偏差,从而导致样品的假阳性和假阴性结果。
在PCR实验室研究过程中,许多操作都会产生气溶胶,例如离心,混合等操作。为了确保环境安全,PCR实验室的设计和建造必须在独立区域内进行设计,以避免与其他环境交叉混合。
二,PCR实验室区域划分
1.试剂制备区,样品制备区,扩增反应区一,纯化区,扩增反应区二和后纯化区的功能划分。
2.设计原则根据卫生部的要求,每个实验区域必须彼此独立并且不能直接连接。每个独立的实验区都有一个专用的更衣室,供员工更换工作服和鞋子。必须严格遵守每个工作区域。方向顺序是从左试剂制备区,标本制备区,扩增反应区之一,纯化区,扩增反应区两个到后纯化区,以避免交叉污染。
3.为了避免样品室中的交叉污染,样品室采用净化控制,整体设计为100,000个。锁定室(缓冲室)设计为正压区域,以确保与外部环境隔离并防止气溶胶污染从相邻区域进入该区域。
3.气流设计
人流和物流的设计有其自己的方式来避免交叉混合。在整个区域设计了一个公共走廊,并在工作区域之间设计了用于试剂和货物转移的专用窗口,以实现人员转移。
四,差压设计
PCR实验室应设计为负压洁净室。通过压差控制,可以保护整个PCR实验过程中的试剂和样品免受气溶胶污染,并减少扩增产物对人员和环境的污染。在每个实验室和非清洁区域之间的闸门之间保持正压力,> 10Pa。实验和浇口之间的气流是试剂制备区域和浇口之间的气流方向,样品制备区域流向浇口,PCR扩增区域中的气流方向从浇口之间流向PCR扩增区域和净化区域。
5.其他安全设施
PCR实验室是一种清洁的空调系统,它使用DC系统而没有回风,以防止交叉污染。在试剂制备室中设计了无尘工作台,以确保试剂不会被空气环境污染;在标本制备室中设计了一个生物安全柜,以确保标本不会污染室内环境,并确保标本受到环境保护的污染。